深圳菲特立科科技针对市场的需求特推出德国**RVLM微生物快速检测系统,可取代传统微生物实验室的快检仪器.www.szfitly.com
志贺氏菌检验技术
志 贺 菌 的 病 原 学 与 实 验 室
诊 断
前 言
志贺菌的细菌又称痢疾杆菌，是肠杆菌中的一群*常见的引起细菌性痢疾的病原菌，对婴幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率高。
菌痢一年四季均可发病, 但有明显的季节性，以夏秋季发病率*高, 在我国福氏和宋内氏痢疾杆菌引起的痢疾较为常见。在新疆甲、乙类传染病报告中发病率占居首位。
一、病 原 学
生物学特性：
形态与染色
培养特性
生化特性
抗原特性
致病性
抵抗力
1、 形态与染色
本菌为革兰氏阴性杆菌，菌
体短小约为2 ～ 3×0.5 ～0.7um、
无鞭毛、不产生芽胞、无荚膜、
无动力、某些菌型有菌毛，易附
着在肠黏膜上皮细胞上。
2、培养特性： 本属细菌为需氧或兼性***，*适
生长温度为37℃，*适PH值为7.2～7.4，
营养要求不高，在普通培养基均可生长。
在液体培养基中呈均匀混浊生长，不形成
菌膜及沉淀。在麦康凯琼脂、伊红美蓝琼
脂、SS琼脂上生长良好，经35～37℃培养
18～24h，可形成直径为2mm，圆形稍凸起、
无色透明或半透明、光滑边缘整齐的菌落。
但宋内氏痢疾杆菌容易形成粗糙型菌落，
菌落较大，边缘不整齐。
3、生化特性
表1 志贺氏菌属的生化反应
实验项目 反 应 + ％
葡萄糖产酸 + 100.0
葡萄糖产气 - 12.1
乳糖 - 0.3
蔗糖 - 0.9
甘露醇 +/ - 80.5
卫予醇 -/+ 5.4
水杨苷 - 0
H2S - 0
尿素酶 - 0
丙二酸盐 - 0
靛基质 d 37.8
甲基红 + 100.0
VP - 0
构橼酸盐 - 0
葡糖糖酸盐 - 0
明胶酶 - 0
苯丙氨酸脱氨酶 - 0
赖氨酸脱氨酶 - 0
鸟氨酸酶 -/+ 20.0
精氨酸双水解酶 -/+ 7.6
4、抗原特性:
志贺菌的抗原结构是由菌体（O）
抗原，表面（K）抗原和菌毛抗原组
成，志贺菌没有鞭毛,故没有H抗（K）
抗原不耐热,加热100℃1h即可破坏。
菌体抗原为多糖复合物,具有特异性。
它分为两种： 型特异性抗原
群特异性抗原
表2: 各群血清型分布表
血清型
A群 痢疾志贺菌 12
B群 福氏志贺菌 16
C 群 鲍氏志贺菌 18
D群 宋内 志贺菌 1
5、致病性：
痢疾杆菌有强烈的内**、痢疾杆
菌还能产生外**引起神经麻痹现象。
当痢疾杆菌随食物进入小肠内,在结肠
和直肠粘膜上大量繁殖,释放**,使
肠粘膜充血、水肿、坏死形成溃疡出
现脓血便、腹泻、**里急后重和全
身中毒症状。
6、抵抗力
志贺菌在外界抵抗力较弱
冰块中可生存数月，
在10～37℃的水中可以生存数天，
在水果、蔬菜及病人接触过的物品上
能存活数周。
本菌对一般化学**剂均敏感。
二．实验室诊断
实验室诊断包括：样品的处理
检验方法
生化试验
血清学试验
挑选菌落：
选择菌落时、应挑选中等大小、
圆形、光滑、无色透明、不发酵乳糖
的菌落。挑选菌落时应在每个平板上
挑取2～5个单个菌落穿种三糖铁尿素
半固体培养基，37℃培养后观察结果，
一般培养18h为*佳。
志贺菌在三糖培养基上的生化反应（见表4）
三、血清学鉴定
首先用志贺氏四种多价血清（A1、
A2、F、宋内）进行玻凝。
四种多价不凝集时，则考虑用鲍氏
多价血清(C1-5、C6-10、C11-14、C15-
18)逐一做玻凝。
如不凝集，可再选志贺氏多价血清：
(A1-4、A5-8、A9-12),如以上血清均不
凝集，即可排除志贺氏菌。
福氏痢疾杆菌抗原结构表（表5）
菌 型 抗 原 型 群 抗 原
1a Ⅰ 3、4
1b Ⅰ 3、4、6
1c Ⅰ 7
2a Ⅱ 3、4
2b Ⅱ 7
3a Ⅲ 6、7
3b Ⅲ 3、4、6
3c Ⅲ 6
4a Ⅳ （3、4）
4b Ⅳ 6
4c Ⅳ 3、4、6、7
5a Ⅴ 4
5b Ⅴ 7
6* Ⅵ （3、4）
X — 7
Y — 3、4
福氏志贺菌的血清鉴定（表6）
报告结果：
凡镜检为G-杆菌
符合志贺氏菌的生化反应
血清凝集阳性者、即可判定菌
型并出据报告。
对可疑菌株应上送上级部门进
行确认。
对确诊菌株接种半固体培养基
内保存。保存期限至少为3个月。
鉴别诊断：
下述培养物可以弃去。
1、在选择性琼脂平板上呈蔓延生
长的培养物。
2、在18～24h内发酵乳糖，蔗糖
的培养物。
3、三糖反应不符合的培养物。
说明及注意事项：
三糖铁尿素半固体为三糖铁琼脂
与尿素半固体两者合并的复合培养物，
可以同时测定葡萄糖、乳糖、蔗糖的
发酵、产酸、产气情况，并观察H2S
的生成，尿素分解和动力；斜面上的
菌苔可做玻片凝集试验。
三糖铁尿素半固体培养基用于肠
道菌的鉴别，效果良好。
由于分解葡萄糖后产酸使PH降低，
中层及斜面变黄。同时又因为细菌利
用蛋白胨后产生的代谢物，在斜面微
氧环境下产碱使斜面变红，而中层保
持厌氧状态，不易氧化及挥发。仍为
黄色。
尿素加热过高，过久可使尿素酶
分解变红；如加热不足又可造成**
不彻底。因此关键问题是准确控制灭
菌温度及其加热时间。
克氏铁琼脂与三糖铁琼脂的主
要区别在于后者加蔗糖可以排除一
些发酵蔗糖的非致病性肠道杆菌科
细菌，两者主要用于初步鉴别肠杆
菌科的细菌。
复习题：
1、志贺菌属分几个群，各群有多少个血清型？
2、志贺菌属在三糖铁尿素半固体琼脂斜面上的生化反应是什么？
3、志贺菌四种多价血清指哪几种？
谢谢！