实验原理
高压蒸汽**是将待**的物品放在一个密闭的加压**锅内，通过加热，使**锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了**器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到**的目的。
在同一温度下，湿热的**效力比干热大，其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低（表Ⅵ-2），二是湿热的穿透力比干热大；三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100℃时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。这种潜热，能迅速提高被**物体的温度，从而增加**效力。
一般培养基用1．05kg /cm2，121．3℃15—30分钟可达到彻底**的目的。**的温度及维持的时间随**物品的性质和容量等具体情况而有所改变。例如含糖培养基用0．56kg/cm2（8磅/英寸2），112．6℃**15分钟，但为了保证效果，可将其他成分先行121．3℃，20分钟**，然后以无菌操作手续加入**的糖溶液。又如盛于试管内的培养基以1．05kg/cm2，121．3℃**20分钟即可，而盛于大瓶内的培养基*好以1．05kg/cm2**30分钟。
实验室中常用的高压蒸汽**锅有立式、卧式和手提式等几种。本实验介绍手提式高压蒸汽**锅的使用方法。
实验试剂
牛肉膏蛋白胨培养基
实验设备
手提式高压蒸汽菌锅等
实验材料
培养皿（6套一包）
实验步骤
1．首先将内层**桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
2．放回**桶，并装入待**物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响**效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层**桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用 1．05kg/cm2，121．3℃，20分钟**。
5．**所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让**锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出**物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。
6．将取出的**培养基放入 37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。
注意事项
检查培养基**是否彻底。