| 1.前增菌：（20 年 月 日） 取检样 加入含BPW225mL的均质杯中，以 r/min均质 min，转入锥形瓶 ℃培养 ；h 2.增菌：（20 年 月 日） 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取 1 mL，转种于 10 mL TTB 内，于 ℃培养 h。同时，另取 1 mL，转种于 10 mL SC 内，于 ℃培养 h； 3.分离：（20 年 月 日） 分别用接种环取增菌液 1 环，划线接种于一个 BS 琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板。于 ℃分别培养 h （XLD 琼脂平板） h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落, BS上可疑菌落形态：※菌落颜色：□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰绿色 ※周围培养基：□呈黑色或棕色□不变□ ※□其它： XLD上可疑菌落形态：□粉红色□黄色□黑色中心□全部黑色的菌落□其它： 4.生化试验：（20 年 月 日） 自选择性琼脂平板上分别挑取 个典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要**,直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基、蛋白胨水（供做靛基质试验）、尿素琼脂 （pH7.2）、***（KCN）培养基和营养琼脂平板，于 ℃培养 ，将已挑菌落的平板储存于室温保留24 h，以备必要时复查。反应结果见表1、表2，表3为补做试验。h 表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果 | 三糖铁琼脂 | 赖氨酸脱羧酶试验 培养基 | 初步判断 | | 斜面 | 底层 | 产气 | 硫化氢 | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | | 注：K：产碱，A：产酸；＋：阳性，－：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。 | 表2生化反应初步鉴别表 | 硫化氢（H2S） | 靛基质 | pH7.2尿素 | ***（KCN） | 赖氨酸脱羧酶 | 反应序号（判断） | | | | | | | | | 注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性；反应序号（判断）：A1、A2、A3或非沙门氏菌。 | 表3补做试验（选做） | 甘露醇 | 山梨醇 | ONPG | 结果判断 | | | | | | | 注：＋：阳性，－：阴性；结果判断：沙门氏菌或非沙门氏菌。 | 5.血清学鉴定：（20 年 月 日） 玻片上划出2个约1cm×2cm的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴多价菌体（O）抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对照。再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合1min，并对着黑暗背景进行观察。 血清凝集结果： （+或-） 7.结果：（20 年 月 日） 沙门氏菌。 |